Ензимите са вещества с белтъчна природа, които ускоряват (катализират) химичните процеси в живия организъм, като в края на ускорения от тях процес остават непроменени.
Сега се смята, че медът съдържа инвертаза, диастаза, каталаза, кисела фосфатаза, глюкозооксидаза, полифенол- оксидаза, пероксидаза, естераза и протеолитични ензими. Първите три ензима са открити в меда доста отдавна, а останалите — през последните десетилетия.
Присъствието на инвертаза (захараза) в тялото на пчелите и в меда за първи път е доказано от Ерленмайер още през 1874 г. В меда попада предимно от глътъчните жлези на пчелите при преработването на нектара и на маната. Инвертазата играе главна роля както в биохимичните процеси, протичащи при преработването на нектара, така и при измененията във въглехидратите при съхранение на меда. В общи линии тази роля се свежда до хидролиза на захарозата до глюкоза и фруктоза, а също така и до образуване на по-висши захари чрез- трансглюкозидазни реакции. Освен захарозата инвертазата разгражда и някои други ди- и тризахариди, но не и лактозата.
Тъй като при лактозата има Р -връзка между съставящите я монозахариди, очевидно е, че инвертазата хидролизира само а-връзки.
Установено е, че инвертазата на меда се състои от няколко изоензима (от 7 до 18), които са всъщност а-глюкозидази с относителна молекулна маса около 51 000. Оптималните условия за хидролизиращото действие на ензима върху захарозата са следните: pH 6,0—6,2, температура 25—30° С, концентрация на субстрата 10—20%. Инвертазната активност обикновено се изразява в грамове захароза, разграждаща се за 1 h от инвертазата, съдържаща се в 100 g мед. Активността на ензима се предлага като показател за качеството, степента на нагряване и за продължителността и условията на съхранение на меда.
Активността на инвертазата, както и на другите компоненти на пчелния мед зависи от растителния произход, степента на преработка на нектара, от интензивността на нектароотделянето, от климатичните условия, сезона и др. Несъмнено влияят също физиологичното състояние, възрастта и породата на пчелите, силата и здравословното състояние на пчелните семейства и т. н. Когато отделянето на нектар е обилно и пашата е близо до пчелините, пчелите бързо напълват медовата си гушка и веднага внасят нектара в килийките, поради което той престоява кратко време в пчелите. Ето защо количеството на инвертазата в меда е по-малко. При влажно време, ниска температура и умерено нектароотделяне пчелите посещават повече цветове, по-дълго време преработват нектара и количеството (активността) на инвертазата се увеличава.
Инвертазното число на меда варира в широки граници — от 2 до 40—50. Със сравнително ниска инвертазна активност се отличават акациевият и лавандуловият мед. Нашите изследвания показват, че инвертазната активност на българския мед варира от 54 до 261 mg глюкоза, които се получават в резултат на хидролизата на захарозата от инвертазата в 1 g мед в продължение на 1 h (инвертазно число от 10,3 до 44,5).
В края на миналия век Ерленмайер и Плант съобщават за наличие на диастаза (амилаза) в пчелния мед. Свойствата на този ензим са изследвани подробно, но не е изяснена ролята му при узряването на меда. Съдържащата се в меда диастаза се състои от а -амилаза, която разгражда нишестето до декстрини, и от р-амилаза, разграждаща го до малтоза. Има няколко хипотези относно произхода на диастазата, но вероятно право имат авторите, които твърдят, че ензимът попада в меда предимно от секрета на слюнчените жлези на пчелите, но също така от нектара и от цветния прашец. Оптималната киселинност (pH) за действие на диастазата е 5—5,3, а температурният оптимум — 35—45° С.
Относителната молекулна маса на ензима е около 24 000. Като мярка на диастазната активност се приема количеството 1%-ов разтвор от нишесте (cm3), което се разгражда за 1 h при определени условия от диастазата, съдържаща се в 1 g мед диастазно число в единици по Готе. Диастазното число е един от основните показатели, които се използуват най-често при анализите за контролиране на качеството и натуралността на меда. По този показател може да се съди и за прегряване на пчелния мед. Диастазната активност се изменя в широки граници под влияние на същите фактори, които обуславят варирането на инвертазната активност. Като долна граница за натуралния мед се приемат 8—10 единици по Готе. Диастазната активност на нашия мед варира от 5,2 до 24,8 единици в зависимост от вида на меда.
По-ниска е при акациевия и лавандуловия и по-висока при кестеновия и липовия мед.